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Após o final do primeiro filme, a união de Selene a vampira e seu namorado Michael o vampiro-lobisomen terá de ser mais forte que o amor. Os dois terão de enfrentar uma legião de vampiros e lobisomen, e a evolução das espécies. Além disso, o centenário vampiro Marcus desperta de seu sono, pronto para matá-los.
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Decididos a exterminar Blade, os vampiros acordam Drácula, o primeiro de todos os vampiros, senhor de poderes que lhe permitem sobreviver à luz do dia e ser quase indestrutível. Em paralelo, iniciam uma campanha difamatória contra Blade na comunicação social humana, colocando o FBI no seu encalço. Após ser preso, Blade é salvo pelos Noctívagos, um grupo de humanos que se dedica a caçar vampiros e que é liderado por Abigail, a filha de Whistler, e a que se associaram o ex-vampiro Hannibal King e a cientista Sommerfield, que é cega. Juntos, Blade e os Noctívagos iniciam uma luta contra Danica Talos, a líder dos vampiros, e o próprio Drácula.
